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MiSeq簇生成失???檢查模板管路清洗——MS-102-9999參數與安裝要點

更新時間:2026-05-27瀏覽:110次

 Illumina MS-102-9999 MiSeq Disposable Wash Tubes為MiSeq及MiSeq Dx測序系統專用運行后清洗耗材,20支/包標準包裝,專用于模板管路清洗(Template Line Wash)流程。使用時將50μL 1:25 NaOCl稀釋液注入試管內950μL實驗室級用水中,配制成0.01% NaOCl清洗液,插入洗滌塔盤位置17直至管頸與塔盤齊平,配合0.5% Tween 20清洗液執行運行后清洗,每次清洗約30分鐘。NaOCl濃度必須嚴格控制在0.01%,過高將導致后續運行中簇生成失?。辉嚬鼙仨毑迦胛恢?7,錯位可能損壞液路系統。


產品技術參數

產品名稱    MiSeq® Disposable Wash Tubes    

貨號    MS-102-9999    

品牌    Illumina    

生產企業    Illumina, Inc.(美國)    

規格    20支/包(20 pack)    

材質    一次性塑料試管    

用途    MiSeq/MiSeq Dx測序儀運行后模板管路清洗    

配套清洗液    0.01% NaOCl溶液(管內配制)    

NaOCl配制方法    50μL 1:25 NaOCl稀釋液 + 950μL實驗室級用水    

安裝位置    洗滌塔盤位置17(Pos 17)    

安裝深度    試管管頸與塔盤齊平    

配合耗材    0.5% Tween 20清洗液、洗滌塔盤、500mL洗瓶    

清洗時長    約30分鐘(含模板管路清洗)    

適用機型    MiSeq系統、MiSeq Dx系統    

必需工作流程    VeriSeq PGS、其他需模板清洗的流程    

儲存條件    常溫干燥,避免污染    

供應商    紅榮微再生物

 

常見問題(FAQ)

Q:MS-102-9999在MiSeq測序儀中的具體用途是什么?

A: MS-102-9999為MiSeq系統專用一次性洗滌管,用于運行后清洗(Post-Run Wash)中的模板管路清洗(Template Line Wash)環節。在標準運行后清洗基礎上,該試管裝載0.01% NaOCl清洗液,插入洗滌塔盤位置17,通過測序儀液路系統對模板管路進行深度清潔,去除殘留試劑、鹽分結晶及交叉污染物,確保下一次運行的簇生成效率和測序數據質量。

 

Q:模板管路清洗與普通運行后清洗有何區別?為何必須使用MS-102-9999?

A: 普通運行后清洗僅使用0.5% Tween 20清洗液沖洗射流管路和吸管,耗時約20分鐘,可去除一般殘留試劑和鹽分。模板管路清洗則額外使用0.01% NaOCl溶液,通過MS-102-9999試管導入液路,對模板管路進行氧化消毒,清除可能累積的有機污染物和生物膜,耗時約30分鐘。Illumina明確:使用VeriSeq PGS工作流程時,必須執行包含模板管路清洗的運行后清洗;對于常規研究用途,也建議在MCS v2.5或更新版本中定期執行,以降低簇生成失敗率和信號衰減風險。

 

Q:NaOCl清洗液的配制濃度和步驟是什么?濃度偏差有何后果?

A: 標準配制流程為三步:第一步,將36μL 5% NaOCl注入864μL實驗室級用水中,混勻得1:25稀釋液;第二步,將50μL該1:25稀釋液注入MS-102-9999試管內的950μL實驗室級用水中,最終得0.01% NaOCl溶液;第三步,將試管插入洗滌塔盤位置17。濃度控制極為關鍵:若NaOCl濃度過高,可能導致后續運行中簇生成失??;若使用非指定濃度(如直接使用5%原液),可能腐蝕液路系統。若無5% NaOCl,可用實驗室級用水配制1mL 0.01% NaOCl溶液替代,但嚴禁在維護清洗或備用清洗中使用NaOCl。

 

Q:MS-102-9999在洗滌塔盤中的安裝位置有何要求?裝錯會怎樣?

A: 裝有0.01% NaOCl清洗液的MS-102-9999試管必須插入洗滌塔盤的位置17(Pos 17),并確保試管管頸與塔盤齊平。該位置經過液路系統設計校準,可使NaOCl溶液在正確時機導入模板管路。Illumina警告:若將含NaOCl的試管插入其他位置,不僅無法達到清洗效果,還可能導致后續測序運行中簇生成失敗,甚至損壞MiSeq液路系統。操作前務必核對塔盤位置編號。

 

Q:該產品適用于哪些MiSeq工作流程?VeriSeq PGS是否必須使用?

A: MS-102-9999適用于所有需要模板管路清洗的MiSeq及MiSeq Dx工作流程。其中,VeriSeq PGS(胚胎植入前遺傳學篩查)工作流程在Illumina系統指南中被明確要求執行包含模板管路清洗的運行后清洗,因此MS-102-9999是該臨床級應用的必需耗材。對于常規NGS研究應用(如16S rRNA測序、靶向重測序、小型基因組測序等),雖非每次強制,但建議定期(如每5-10次運行或出現簇生成效率下降時)執行一次模板管路清洗,以維持儀器最佳性能。

 

Q:20支/包的規格如何計算使用量?儲存條件是什么?

A: MS-102-9999為20支/包標準包裝。每次模板管路清洗消耗1支試管,因此單包可支持20次模板清洗。若實驗室每周執行1次模板清洗,單包可用約5個月;若按VeriSeq PGS高頻運行(每次運行后均需清洗),需根據月度運行通量計算采購量。該產品為一次性塑料耗材,無特殊溫控要求,常溫干燥儲存即可,但需避免灰塵污染管口。開封后建議盡快使用,長期暴露可能增加污染風險。

 

Q:紅榮微再生物的Illumina MiSeq耗材產品線還包括哪些?

A: 紅榮微再生物作為Illumina代理,提供MiSeq系統全系列配套耗材:測序試劑盒(MS-102-2001/2002/2003 v2系列、MS-102-3001/3003 v3系列)、Nano/Micro試劑盒(MS-103-1001/1002/1003)、PR2緩沖液、HT1緩沖液、PhiX對照品、流動槽(Flow Cell)、洗滌塔盤、清洗瓶,以及文庫制備試劑盒(如TruSeq系列)。

 

Q:使用MS-102-9999進行模板清洗的操作注意事項有哪些?

A: 一是濃度精準,務必使用5% NaOCl原液按1:25稀釋后再配制0.01%工作液,禁止直接使用高濃度原液;二是位置準確,僅插入洗滌塔盤位置17,操作前核對編號;三是時機正確,僅在運行后清洗(Post-Run Wash)中使用,維護清洗(Maintenance Wash)和備用清洗(Standby Wash)中禁用NaOCl;四是安全防護,NaOCl為潛在危險化學品,操作時穿戴護目鏡、手套和實驗服,廢液按化學廢棄物處理;五是運行后保留,清洗完成后將流動槽、洗滌塔盤和剩余清洗液留在儀器上,防止吸管干燥進氣。